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Newsletter vol.2

14 Feb 2025 Chinese

Newsletter for Intravital In Vivo Imaging
IVIM TECHNOLOGY 
NEWSLETTER
2023年 4月,第2卷

关于IVIM Technology

IVIM Technology, Inc.是一家总部位于韩国的活体共聚焦双光子显微镜制造商兼活体体内成像(in vivo imaging)服务提供商,拥有优秀的专家研究人员和客户服务体系。

进行活体内成像时,使用最优化的肽标记方法替代具有化学反应的肽合成方式


一般来说,为了通过荧光键合直观地检查肽在活体内的内部机制和分布,需要对肽序列的C末端或N末端进行化学合成。然而,这种化学合成方法的不便之处在于,在进行荧光偶联之前,必须要对肽的功效评价和内部生物反应的体外实验结果进行重新实验。IVIM Technology对通过生物显微镜使用荧光偶联肽来研究其内部机制和分布的方法进行了优化,因此不会改变其原有的功能特性。
“IVIM Technology通过生物偶联(Bio-conjugation)而不是化学合成的方式为活体内成像优化了独特的肽标记方法,使在生物显微镜下实时、长时间地监测肽分布机制和功效一事成为可能。”

NHS酯生物反应

N-羟基琥珀酰亚胺(N-Hydroxy Succinimide, NHS)酯反应技术通常被用于荧光标记、荧光材料和各种荧光发光材料以研究活体体内生物分子机制及化学反应。这些NHS酯基团和氨基之间的反应取决于pH值,一般最佳pH值为8.3~8.5。

大部分的NHS酯类物质溶于水。然而,最佳的反应设计有时是通过将其与二甲基亚砜(DMSO)或二甲基甲酰胺(DMF)混合后,将pH值调节到8.3至8.5来完成的。在NHS酯胺反应中,最近有一种叫NHS酯修饰的技术。它是经由酯基和胺基之间的化学反应形成的,被广泛应用于抗体药物偶联物的连接部分及多肽荧光标记。 

具有时间依赖性的生物反应肽标记物成像

对于NHS酯类生物偶联药物与多肽的时间依赖性成像,可以使用颅脑成像窗口(Cranial Imaging Window, CIW)动物模型。针对CIW动物模型,可以通过活体动物的窗口成像实时观察活体动物的大脑皮层、脑肿瘤和神经血管变化等神经炎症反应。IVM-CM3具有共聚焦和双光子成像能力,且拥有实时激光扫描速度,可以在植入颅脑成像窗口的情况下对小鼠大脑皮层进行成像,并实现细胞水平的观察。另外,利用z轴横截面成像功能,共聚焦显微镜可获得深度达200μm的脑部图像,并依据时间进行清晰的可视化。

定量研究
多肽的分布可以通过一段时间的活体体内成像后进行绘图和定量分析,随后在生物显微镜下计算多肽荧光的吸光度。图形的统计分析可以利用如Sigma Plot、Graph Prism、Origin等统计软件来获得科学客观的结果。




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